Detaljerad information för diarienr 2006-6148
		Besl. instans: M Ämnesområde: Heart & blood vessels Beslutsdat: 2006-11-08 Namn: Ehrenborg, Ewa Titel: Docent Kön: Kvinna Univ./Institution: Karolinska Institutet - Institutionen för medicin, Solna (MedS) Projekttitel: Funktionella genetiska studier av tre viktiga faktorer som reglerar cellers lipidmetabolism i relation till utveckling av metabol dysfunktion och kardiovaskulär sjukdom Project title: Functional genetic studies of three important regulators of lipid metabolism in cells in relation to development of metabolic dysfunction and cardiovascular disease Värdhögskola: Karolinska Institutet SCB-klassificering: Kardiovaskulär medicin, Molekylär medicin (genetik o patologi), Diabetologi Beviljat(SEK): Bidragsform/Finansieringskälla   2007   Projektbidrag/ Grönbergska fonden   350000   Projektbidrag/Vetenskapsrådet, medicinsk forskning   350000 350000 Beskrivning: BAKGRUND Typ 2-diabetes, bukfetma, förhöjda blodfetter och högt blodtryck ingår i det metabola syndromet och utgör viktiga och kända riskfaktorer för insjuknande i hjärt- och kärlsjukdomar. Det metabola syndromet karakteriseras av insulinresistens och en kompensatorisk ökning av fria fettsyror i plasma samt ökad inlagring av fett i olika vävnader som t ex levern. Peroxisom proliferator aktiverad receptor delta (PPARD) återfinns i cellkärnan och styr många gener som är involverade i glukos- och lipidmetabolismen. Dess aktivitet regleras bl a fetter som fås från dieten och PPARD betraktas därmed som en metabol sensor. Adipocyt differentieringsrelaterat protein (ADFP) och microsomalt triglycerid transfer protein (MTTP) är två gener som regleras av PPARD. ADFP har betydelse för bl a hantering och lagring av fett intracellulärt. ADFP är diorekt korrelerat till mängden fett och är uppreglerad i leverceller vid fettlever. MTTP spelar stor roll för utsöndring av lipidinnehållande partiklar från lever och hjärta. PPARD, ADFP och MTTP är potentiellt intressanta målproteiner för behandling av metabola och kardiovaskulära sjukdomar. Resultatet av studierna kommer att publiceras i internationella vetenskapliga tidskrifter och presenteras vid kongresser. MÅLSÄTTNINGAR Karakterisera fysiologiska och molekylära konsekvenser av förändringar i PPARD genuttryck och specifika PPAR-bindande DNA-sekvenser. Undersöka genetiska varianter i ADFP och MTTP och deras koppling till metabol dysfunktion och kardiovaskulär sjukdom. ARBETSPLAN Reglering av PPARD: Kunskap om hur PPARD regleras är bristfällig. Vi arbetar utifrån hypotesen att mängden PPARD har betydelse för dess roll som metabol sensor. Reglering av PPARD kommer att studeras med reportergen-teknik där identifierade styrregioner i PPARD-genen kommer att analyseras. Vi har funnit ett flertal genprodukter från PPARD hos människa vilket tyder på att PPARD regleras genom alternativ bearbetning (splicing). Samtliga genprodukter från PPARD kodar för samma protein men innehåller varierande längd av icke-kodande sekvenser vilka spelar roll för hur mycket PPARD protein som bildas. Vi avser att studera hur hormoner och inflammatoriska ämnen påverkar mängden av respektive genprodukt från PPARD vilka i sin tur har betydelse för hur mycket aktivt PPARD protein som kan bildas. Karakterisering av specifika PPAR-DNA bindande sekvenser: PPARD styr genuttryck genom bindning till specifica DNA-sekvenser, sk PPRE. Sekvensen för dessa PPRE varierar och det är relativt okänt vad det är som avgör om ett PPRE är funktionellt eller ej. Apo-AII är en potentiell målgen för PPARD som innehåller flera PPREs i sin styrregion men alla verkar inte vara funktionella. Bakgrunden till denna variation kommer att studeras mha molekylärbiologiska och biokemiska DNA:protein-bindningsstudier som ett första led för att ta reda på vilken betydelse PPRE-sekvensen har för bindning av PPARD och dess funktion. Genetiska varianter av ADFP relaterat till metabol sjukdom och kardiovaskulära riskfaktorer: Genetiska varianter i ADFP-genen och kombinationer av dem kommer att analyseras genom att studera dessa i relation till olika metabola faktorer hos friska medelålders män samt i kardiovaskulära populationsstudier. Om association mellan specifika genetiska varianter och metabola faktorer detekteras kommer intressanta varianter att analyseras in vitro med molekylärbiologiska metoder och in vivo genom att undersöka monocyter och fettvävsbiopsier. Karakterisering av genetiska varianter i MTTP-genens styrregion: Bärare av tre genetiska varianter har lägre LDL-kolesterolnivåer men en 3-faldig ökad risk att drabbas av hjärtinfarkt. Varianter i styrregionen karakteriseras funktionellt ex vivo i lever med en av oss nyligen utvecklad kvantitativ metod för mätning av variantspecifikt genuttryck av MTTP och in vitro mha reportergen- och DNA:protein-bindningsstudier. Kombinationer av genvarianter i MTTP analyseras i två kardiovaskulära populationsstudier för att undersöka om tidigare funnet samband mellan genetiska data och förekomst av hjärtinfarkt kan bekräftas. BETYDELSE/TILLÄMPNING: PPARD, ADFP och MTTP är regulatorer av intracellulär fettmetabolism och utgör således viktiga determinanter för kardiovaskulära riskfaktorer. Grundläggande kunskaper och bättre förståelse för bakomliggande mekanismer om deras reglering och funktion kan leda till alternativa behandlingsformer och förebyggande åtgärder.